技術(shù)文章
要控制實驗室的無菌環(huán)境,可以遵循以下步驟和要點,以確保實驗環(huán)境的無菌性和實驗結(jié)果的準確性:
一、無菌室的設(shè)計與管理
無菌室的要求:
無菌室應(yīng)矮小、平整,高2.2~2.3米,內(nèi)部裝修應(yīng)平整、光滑,無凹凸不平或棱角等,便于擦洗及殺菌。
無菌室周圍需設(shè)緩沖走廊,走廊旁再設(shè)緩沖間,其面積可小于無菌室。
無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜,其電源開關(guān)均應(yīng)設(shè)在室外。
無菌室與緩沖間進出口應(yīng)設(shè)拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應(yīng)錯開,以免空氣對流造成污染。
建立管理制度:
制定并遵守?zé)o菌室管理制度,確保所有進入無菌室的人員都了解并遵循相關(guān)規(guī)定。
二、無菌室的潔凈度要求
環(huán)境潔凈度:
無菌操作間應(yīng)滿足相應(yīng)潔凈級別的操作環(huán)境,環(huán)境應(yīng)符合萬級潔凈度要求。具體標準為每立方米直徑大于等于0.5微米的塵埃粒子數(shù)應(yīng)小于等于350000個,30分鐘塵降菌落數(shù)小于等于3cfu/立方米。
無菌室的空間潔凈度應(yīng)達到10000級,但操作區(qū)域如超凈工作臺、生物安全柜里需要達到潔凈度100級。
定期檢測:
對于無菌室的潔凈度,應(yīng)定期進行檢測,以確保其始終滿足實驗要求。
三、無菌實驗流程
實驗前準備:
對實驗臺、手、檢驗用具進行消毒,確保無菌環(huán)境和無菌實驗用品。
防護衣服、口罩、手套等必須佩帶,以減少微生物污染的風(fēng)險。
實驗操作:
在進行接種或向培養(yǎng)皿內(nèi)倒培養(yǎng)基時,試管口或瓶壁外面不要接觸皿底,試管或瓶口應(yīng)傾斜一下在火焰上通過,以減少污染的風(fēng)險。
四、物品消毒
物品消毒:
所有進入無菌環(huán)境的物品都必須經(jīng)過嚴格的消毒處理,包括實驗用具、培養(yǎng)基、檢驗樣品等。
五、其他措施
空氣流通:
無菌室內(nèi)應(yīng)保持良好的空氣流通,避免空氣死角,減少微生物滋生的機會。
紫外線照射:
定期使用紫外線燈對無菌室進行照射消毒,以殺滅空氣中的微生物。
使用無菌技術(shù):
在實驗操作過程中,應(yīng)使用無菌技術(shù),如無菌稱樣、無菌接種等,以防止微生物的污染。
定期清潔與消毒:
定期對無菌室進行清潔和消毒,包括地面、墻面、天花板、設(shè)備表面等,以保持其無菌狀態(tài)。
通過遵循以上步驟和要點,可以有效地控制實驗室的無菌環(huán)境,確保實驗的準確性和可靠性。